深夜12点，美国洛杉矶反恐小组负责人杰克·鲍尔（基弗·萨瑟兰KieferSutherland饰）接到同事妮娜·麦尔斯（莎拉·克拉克SarahClarke饰）的电话，让他火速回办公室，因为情报显示。首位黑人总统候选人——参议员大卫·派尔默（丹尼斯·海斯伯特DennisHaysbert饰）正受到暗杀威胁，而且CTU里面可能有内鬼。因此杰克需要在接下来的这24小时内，追踪杀手保护总统候选人，并查出内鬼。...

在经历了上一次的恐怖袭击之后，由于政府对CTU应对恐怖事件的解决方式不太满意，还是最终决定解散CTU。杰克·鲍尔（基弗·萨瑟兰KieferSutherland饰）也因使用酷刑等非法手段来防止恐怖袭击，而受到审查。原本以为自己终将在监狱里度过余生，却因死而复生的前同事托尼（卡洛斯·博纳德CarlosBernard饰）的出现，彻底打乱了杰克现有的生活。托尼希望杰克能与他一起，共同调查又一次在美国大路上...